Метод пунктатов и отпечатков красного костного мозга – методика, клиническое значение. Нормальная миелограмма. Клетки костномозгового окружения, морфологическая оценка и клиническое значение.

Содержание

методика, клиническое значение. Нормальная миелограмма. Клетки костномозгового окружения, морфологическая оценка и клиническое значение.

Цитологический анализ костного мозга играет большую роль в диагностике заболеваний кроветворной системы. Подсчет миелограммы дает представление о характере эритропоэза (нормобластический или мегалобластический), позволяет обнаружить клетки, характерные для различных заболеваний системы крови (множественной миеломы, острых лейкозов, хронического миелолейкоза, хронического лимфолейкоза, лейкемизированных неходжкинских лимфом, болезни Гоше, Ниманна-Пика, метастазов рака в костном мозге и др.). Данные миелограммы необходимы для проведения дифференциального диагноза с лейкемоидными реакциями. Сопоставление данных костномозгового кроветворения с картиной периферической крови и клинической симптоматикой позволяет уточнить причину анемии. Имеются абсолютные и относительные показания к стернальной пункции.

Абсолютные показания:

все анемии (кроме типичной железодефицитной), различные цитопении (одноростковая, двуростковая, панцитопения), острые лейкозы, хронические лейкозы в начальной стадии (для подтверждения диагноза и исключения лейкемоидных реакций), выраженное изолированное увеличение СОЭ (для исключения множественной миеломы и макроглобулинемии Вальденстрема), подозрение на метастазы злокачественной опухоли в костном мозге. Относительные показания: железодефицитные анемии, хронические лейкозы в развернутой стадии.

Аспирационная биопсия костного мозга является технически простым, безопасным и легкодоступным методом. Наиболее часто используется стернальная пункция, предложенная в 1927 г. М. И. Аринкиным и впервые выполненная на кафедре факультетской терапии Военно-медицинской академии. При необходимости можно пунктировать гребень или бугристость подвздошной кости, у детей — пяточную кость. Пункция грудины выполняется иглой И. А. Кассирского с предохранительным щитком. После взятия аспирата костного мозга производят подсчет количества миелокариоцитов, мегакариоцитов, ретикулоцитов, готовят мазки для подсчета миелограммы.

Морфологический анализ клеток костного мозга (подсчет миелограммы) производят на 500 клеток костного мозга, после чего вычисляют процентное содержание каждого вида клеток. При анализе миелограммы необходимо оценить клеточность костного мозга (нормо-, гипо- или гиперклеточный), дать качественную характеристику всех клеточных рядов с определением индексов созревания, лейкоэритробластического соотношения, характера эритропоэза (нормобластический, мегалобластический или с мегалобластоидными чертами) и количества митозов. Отдельно следует оценить мегакариоцитопоэз (количество и функция мегакариоцитов).

Нормальная миелограмма:

Бласты – 0,1-1,1% Миелобласты – 0,2-1,7% Нейтрофилы: промиелоциты – 1,0-4,1% миелоциты

– 7,0-12,2% метамиелоциты – 8,0-15,0% палочкоядерные – 12,7-23,7% сегментоядерыне – 13,1-24,1% Все нейтрофильные элементы – 52,7-68,9% Эозинофилы – 0,5-5,8% Базофилы – 0-0,5% Лимфоциты – 4,3-13,7% Моноциты – 0,7-3,1% Плазматические клетки – 0,1-1,8% Эритробласты – 0,2-1,1% Пронормоциты – 0,1-1,2% Нормоциты: базофильные – 1,4-4,6% полихроматофильные – 8,9-16,9% оксифильные – 0,8-5,6% Все эритроцитные элементы – 14,5-26,5% Ретикулярные клетки – 0,1-1,6% Количество миелокариоцитов – (41,6-195,0)·10⁹/л Количество мегакариоцитов – (0,05-0,15)·10⁹/л или (0,2-0,4% костномозговых элементов)

Костномозговой индекс созревания нейтрофилов определяется по формуле: (промиелоциты + миелоциты + метамиелоциты)/ (палочкоядерные + сегментоядерные нейтрофилы) В норме костномозговой индекс созревания нейтрофилов равен 0,6-0,8.

Индекс созревания эритроидных клеток определяется по формуле: (полихроматофильные + оксифильные нормоциты)/(эритробласты + базофильные + полихроматофильные + оксифильные нормоциты) В норме индекс созревания эритроидных клеток равен 0,8-0,9. Уменьшение индекса свидетельствует о задержке гемоглобинизации и/или преобладании молодых базофильных нормоцитов, дает возможность ориентировочно оценить запасы и обмен железа в организме.

Лейкоэритробластическое соотношение определяется по формуле: (гранулоциты): (ядросодержащие клетки эритроидного ряда) и в норме составляет 3-4:1. Количество митозов в норме составляет 3,5 на 1000 для клеток гранулоцитарного ряда и 5 на 1000 — для клеток эритроидного ряда.

Для более полной характеристики гемопоэза, особенно мегакариоцитопоэза, в ряде случаев требуется гистологическое исследование костного мозга методом трепанобиопсии. Во время трепанобиопсии производится извлечение фрагмента костного мозга с сохранением его структуры, благодаря чему метод является достаточно информативным.

Стернальная пункция костного мозга – диагностическая процедура необходима для выяснения причины возникновения лейкоцитоза, тромбоцитоза, анемии и выявления метастаз в костном мозге, а также проведения контроля качества лечения. Пункция более проста в техническом отношении, чем трепанобиопсия. Она проводится в амбулаторных условиях с соблюдением всех правил асептики и антисептики. Процедура осуществляется при помощи короткой толстостенной стерильной иглы с предохранительным щитком, обеспечивающим защиту органов средостения. Как правило, прокол производится в верхней трети грудины, на уровне II-III межреберья. Костный мозг собирают шприцем емкостью 10-20 мл.

Клетки костномозгового окружения:

При изучении клеточного состава костного мозга следует иметь в виду клетки, относимые к элементам стромы костного мозга. В нормальном пунктате костного мозга они составляют не более 0,5 % всего клеточного состава.

При различных патологических состояниях их число увеличивается.

В свете современных представлений к стромальным клеткам относят ретикулярные клетки, фибробласты и фиброциты, а также остеобласты. Стромальпые клетки гистогенетически не связаны со стволовой кроветворной клеткой.

Ретикулярные клетки можно видеть при опустошении костного мозга при апластических состояниях. Они находятся в местах перекрестов ретикулярной сети. Их нитчатым отросткам следует приписать образование ретикулярной стромы костного мозга.

Фибробласты. Фиброз костного мозга развивается при многих патологических процессах. Элементы фиброза при изучении костного мозга в одних случаях определяются в виде разрозненных фибробластов (или их производных-фиброцитов), в других

– отмечается разрастание фиброзной ткани, определяемой в гистологических препаратах костномозговой ткани.

По морфологическим признакам определить фибробласт (или фиброцит) нетрудно. Ядро овальное или несколько удлиненное, имеет в зависимости от возраста различную плотность. В нем центрально расположено маленькое ядрышко. По полюсам клетки определяется хвостато вытянутая цитоплазма.

Остеокласты – клетки, участвующие в костеобразовании. Форма удлиненная, цилиндрическая или неправильная. Длинный диаметр остеобласта достигает 20-30 мкм. Ядра клеток округлые или слегка овальные, часто эксцентричные. Структура хроматиновых нитей ядра довольно стройная; в ядре видно одно маленькое ядрышко. По морфологическим чертам остеобласт может быть сходен с проплазмоцитами и миеломными клетками. В связи с этим им ошибочно приписывали генетическое родство. Изучение изолированных клеток (остеобластов) может привести к ложному представлению о них, как о плазматических клетках или об элементах миеломы.

Цитология: отпечаток трепанобиоптата костного мозга

Анализ отпечатков трепанобиоптата костного мозга

Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга, которое позволяет изучить его морфологический состав, проводится для диагностирования и клинического разграничения заболеваний системы крови.

Сроки выполнения	До 5 дней

Синонимы (rus)	Анализ отпечатков трепанобиоптата костного мозга

Синонимы (eng)	Fingerprint analysis trepanobiopsy bone marrow

Методы исследования	Микроскопия

Подготовка к анализу	Специальная подготовка к анализу не требуется

Вид биоматериала и способы его взятия	Костный мозг, трепанобиопсия

Красный костный мозг – это главный кроветворный орган человека, который находится в плоских костях. Основная его функция заключается в образовании и созревании форменных кровяных элементов (эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов). Гемопоэз представляет собой сложную систему, регуляция которой возможна только при взаимодействии с соединительной оболочкой, выстилающей костномозговую полость – стромой. В ее составе имеются эндотелиальные, жировые и эндостальные клетки, образующие ячейки для клеток миелоидного ряда.

К сожалению, при подозрении на развитие в кроветворной системе патологических процессов практикующие специалисты не всегда могут поставить точный диагноз по итоговым данным исследований периферической крови. Особенно сложные случаи требуют изучения отпечатков трепанобиоптата костного мозга, полученных путем забора биологического материала непосредственно из губчатых костей скелета.

Когда делают анализ

Проведение цитологического анализа отпечатков трепанобиоптата костного мозга необходимо при:

диагностировании множественной миеломы, а-пластической анемии и миелопролиферативных заболеваний – эссенциальной тромбоцитемии, идиопатического миелофиброза, истинной полицитемии;
увеличении селезенки неясной этиологии;
определении стадии лимфогранулематоза и характера поражения костного мозга при лимфолейкозе;
оценивании полноты ремиссии лейкоза;
подозрении на метастазы из злокачественных новообразований других органов;
мониторинге состояния больных гематологических отделений при проведении курса лечебных мероприятий.

Методика проведения анализа

Взятие образца биологического материала осуществляется в условиях клинико-диагностического центра. Для выполнения процедуры используется специальная игла (трепан), оснащенная предохранителем, который препятствует чрезмерно глубокому проникновению в полость кости – это обеспечивает безопасность манипуляции. Квалифицированный специалист выполняет следующие действия:

дезинфицирует кожные покровы 70% медицинским спиртом;
вводит местный анестетик;
прокалывает надкостницу подвздошной кости и получает образец биоматериала.

Расшифровка анализа

Отпечаток трепанобиоптата красного костного мозга позволяет тщательно изучить его клеточный состав и получить достаточно информации о соотношении и степени активности всех ростков кроветворения.

Заключение врача цитолога отражает итоговые данные исследования:

определение типа кроветворения;
процентное содержание клеточных элементов;
костномозговые индексы созревания нейтрофилов, эритробластов, лейкобластов;
наличие клеток, характерных для определенных патологических процессов.

Точная интерпретация результатов анализа проводится лечащим врачом на основе особенностей клинической картины и итоговых данных других лабораторных и инструментальных исследований.

Костный мозг – Получение материала и приготовление препаратов для микроскопического исследования костного мозга – Клетки крови

Детальное изучение клеточного состава и структуры костного мозга началось с внедрения в клиническую практику метода стернальной пункции, предложенного М. И. Аринкиным в 1927 г., а затем прижизненного гистологического исследования пунктата подвздошной кости с помощью трепанобиопсии.

Метод стернальной пункции

Для выполнения стернальной пункции по М. И. Аринкину используется пункционно-биопсийная игла, имеющая предохранительный щиток, который можно установить на требуемую глубину в зависимости от толщины кожи и подкожной жировой клетчатки, что гарантирует от прокола задней пластинки грудины.

Костный мозг насасывают шприцем емкостью 10—20 мл с плотно пригнанным поршнем для обеспечения требуемого вакуума. Прокол производят в положении исследуемого лежа на спине на уровне прикрепления III—IV ребра по средней линии, поскольку передняя стенка тела грудины тоньше и имеет ровную или слегка вогнутую поверхность, наиболее удобную для пункции. Кроме того, в этой области костного мозга находится большое количество клеток.

Можно пунктировать ребра и остистые отростки позвонков (чаще всего — III и IV поясничных). При пункции остистых отростков позвонков больной сидит, наклонившись вперед. У детей существует опасность прокола грудины ввиду ее большей эластичности и индивидуальных различий в толщине кости. Поэтому детям, особенно новорожденным и грудного возраста, предпочтительно делать пункцию в верхней трети большеберцовой кости с внутренней стороны дистального эпифиза бедренной или пяточной кости. Пункцию подвздошной кости производят на 10—20 мм кзади от передней ости.

Методика получения костного мозга для исследования методом стернальной пункции

Место пункции дезинфицируют спиртом и спиртовым раствором йода. Затем кожу, подкожную жировую клетчатку и надкостницу инфильтрируют тонкой иглой 2 мл 1—2 % раствора новокаина. Возможно пунктирование без обезболивания либо с помощью анестезии кожи хлорэтилом.

Шприц и пункционную иглу стерилизуют сухим способом или кипячением, тщательно высушивают спиртом, а затем эфиром.

Перед тем как произвести пункцию, с помощью винтовой нарезки устанавливают предохранительный щиток на необходимую глубину прокола и вставляют мандрен. Ориентировочные данные, которых следует придерживаться при установке предохранительного щитка при пункции грудины, приведены в таблице.

Ориентировочные показатели проведения стернальной пункции
Возраст больного, лет	Уровень расположения предохранительного щитка (глубина прокола), мм
Возраст больного, лет	для истощенных больных	для больных среднего питания	для больных повышенного питания
До 3	2—3	3—4	4—5
4—5	3—4	4—5	5—6
6—10	5—6	6—7	7—8
11—14	7—8	8—9	9—10
15—17	9—10	10—11	11—12
Старше 17	10—11	11—12	12—13

Направляя иглу перпендикулярно к грудине по ее средней линии, быстрым движением прокалывают кожу, подкожную жировую клетчатку и наружную пластинку грудины. В этот момент сопротивление уменьшается и игла, как бы проваливаясь, входит в костный мозг. При этом ее устанавливают вертикально, неподвижно. Если игла находится не в вертикальном положении, то, не вынимая ее, отодвигают предохранитель несколько выше и вновь продвигают иглу.

Следует учитывать, что при раке, миеломной болезни, остеомиелите и других остеолитических процессах игла, попадая в очаг поражения, встречает меньшее сопротивление и плохо фиксируется в кости.

После того как игла вошла в костный мозг, мандрен извлекают и плотно насаживают шприц. Далее, оттягивая поршень шприца, насасывают не более 0,5 мл костного мозга (при большем количестве пунктата в него может попасть много периферической крови).

Если получить костный мозг не удается, то, не вынимая иглы, шприц снимают, вновь вводят мандрен и переводят иглу в другое положение — выше, ниже или в сторону. Затем снова насасывают шприцем немного пунктата. После взятия костного мозга иглу, не разъединяя со шприцем, извлекают из грудины, а место прокола закрывают стерильной наклейкой.

Полученный материал переносят на часовое стекло и быстро насасывают в смеситель для лейкоцитов или для эритроцитов до метки 0,5 (при нормальном или повышенном количестве лейкоцитов в периферической крови рекомендуется использование смесителя-меланжера для эритроцитов, а при лейкопении — смесителя-меланжера для лейкоцитов).

Затем до метки «11» в смеситель для лейкоцитов или до метки «101» в смеситель для эритроцитов набирают 3—5 % раствор уксусной кислоты. Содержимое смесителя тщательно перемешивают, выпускают из капиллярной части жидкость, а последующими каплями заполняют счетную камеру и подсчитывают клетки как лейкоциты крови, учитывая разведение в соответствующем смесителе. Общее количество миелокариоцитов (клеток с ядрами) колеблется от 50 Г до 250 Г в 1 л, по-видимому, вследствие неодинакового состава костного мозга в различных его участках.

Подсчет абсолютного количества миелокариоцитов не является необходимым. В большинстве случаев ограничиваются подсчетом процентного содержания в мазке пунктата различных ядерных клеток. При этом о количестве клеток судят ориентировочно по мазкам.

Для приготовления препаратов из пунктата грудины на часовом стекле отбирают частицы костного мозга и готовят из них тонкие мазки, примесь крови удаляют с помощью фильтровальной бумаги или пастеровской пипеткой.

Большое практическое значение имеет правильное приготовление мазка из ткани костного мозга, поскольку примесь периферической крови искажает представление о составе его клеток. В правильно приготовленном препарате клетки расположены густо, но отдельно и их структура четко видна. Рекомендуется готовить серию мазков, используя для этого весь полученный при пункции материал. Мазки необходимо готовить быстро, так как свертывание костного мозга наступает раньше, чем свертывание периферической крови, и клетки могут повреждаться настолько, что их невозможно дифференцировать.

При гипопластических состояниях костного мозга в мазках обнаруживается небольшое количество клеток, иногда они совсем отсутствуют. Для выяснения, является это следствием патологического процесса или неправильно проведенной пункции, необходимы повторные пунктирование и исследование пунктата.

Фиксация и окраска мазков пунктата производится так же, как и мазков периферической крови, лучше всего они окрашиваются по Паппенгейму—Крюкову.

Трепанобиопсия подвздошной кости

Необходимость прижизненного изучения гистологических препаратов костного мозга, полученного методом трепанобиопсии, возникает в тех случаях, когда при пункции не удается получить достаточное количество материала для подтверждения наличия того или иного патологического процесса.

Особенно важное значение приобретает гистологический метод при таких заболеваниях, как лейкоз, истинная полицитемия (эритремия), остеомиелофиброз, гипопластическая анемия.

Для прокола и извлечения костной ткани предложено использовать иглу-троакар, сконструированную по принципу пункционно-биопсийной иглы. Толщина иглы-троакара 3 мм, внутренний диаметр 2 мм, длина 40 мм. Периферический конец иглы подобен фрезе, спиралевидный, благодаря чему ею можно при вращении срезать костную ткань. Игла состоит из мандрена (стилета с заостренным концом) и рукоятки.

Методика получения костного мозга для исследования методом трепанобиопсии

Прокол производят в области подвздошного гребня, отступя 20—30 мм кзади от его верхней передней ости. Технически удобнее делать левостороннюю биопсию.

Место прокола дезинфицируют спиртом и спиртовым раствором йода. Иглу предварительно стерилизуют сухим способом или кипячением, а затем высушивают спиртом и эфиром. С помощью винтовой нарезки устанавливают предохранительный щиток иглы на необходимую глубину прокола, учитывая толщину подкожной жировой клетчатки.

Перед введением иглы-троакара производят анестезию кожи, подкожной клетчатки и надкостницы 2 % раствором новокаина.

Проникнув иглой-троакаром в мягкие ткани, концом заостренного мандрена нащупывают место на кости, где следует делать прокол. Затем иглу вращательными движениями под некоторым давлением вводят в кость. При появлении ощущения прочной фиксации иглы мандрен извлекают. Разъединив мандрен и рукоятку, последнюю навинчивают на иглу, зафиксированную в кости. Вращательными движениями по часовой стрелке иглу вводят в кость. Затем также вращательным движением извлекают ее. Цилиндрический столбик костной ткани, находящийся в игле, выталкивают мандреном из просвета иглы на предметное стекло, а с него переносят в банку с формалином и отправляют на гистологическое исследование.

Из оставшегося на стекле, игле и мандрене костного мозга делают мазки. Чаще всего удается вырезать и извлечь кусочек костной ткани длиной от 6 до 10 мм, а иногда и больше.

В пунктате костного мозга у здоровых людей и больных с гиперпластическими процессами обнаруживается много различных клеток. При тяжелой форме гипопластического (апластического) процесса трепанат имеет желтый цвет, что обусловлено почти полным отсутствием костного мозга и заменой его жировой тканью.

При всех формах остеомиелофиброза и миелофиброза извлеченный кусочек костной ткани выглядит «сухим» и из него удается извлечь лишь очень небольшое количество костного мозга Для приготовления мазков.

Введение

Гематопоэз это термин, использующийся для описания процесса продукции клеток крови. Клетки крови всех типов вырабатываются внутри костного мозга, хотя развитие лимфоцитов наблюдается, преимущественно, в периферических лимфоидных тканях. У здорового взрослого животного гематопоэз ограничивается деятельностью красного костного мозга, который находится в плоских костях, а так же в проксимальных частях костномозговых полостей в длинных губчатых костях, особенно в плечевых и бедренных. Если потребность в клетках крови возрастает, может быть возобновлена деятельность неактивного желтого костного мозга в других местах. Кроме того, печень и селезёнка также сохраняют способность вырабатывать клетки крови, если костный мозг не способен удовлетворять потребности: производство клеток крови этими органами носит название экстрамедуллярного гемопоэза.

Пробы костного мозга могут быть взяты либо аспирацией с помощью тонкой иглы, либо путём биопсии. Аспираты с помощью тонкой иглы получить легко: их преимущество состоит в том, что можно быстро провести цитологическое исследование. В тех случаях когда повторные попытки получить аспират оканчиваются неудачей, показано применение пункционной биопсии. Такие состояния, как миелофиброз, могут быть определены только с помощью гистологического анализа ткани, полученной путём биопсии.

Оценка костного мозга должна всегда производиться в сочетании с гемограммой, количественным и качественным исследованием крови. Предоставляя пробы костного мозга для патологического исследования, очень важно дать при этом подробную клиническую историю с полным перечнем гематологических результатов и с указанием всех биохимических отклонений от нормы.

Показания для отбора проб костного мозга

Панцитопения (снижение количества всех клеток всех линий)
Цитопения, воздействующая на любую отдельную линию клеток, или бицитопения, например нейтропения, тромбоцитопения или анемия, особенно негенеративная
Наличие ненормальных, недоразвитых или нетипичных лимфоидных или миелоидных (гранулоцитарных) клеток
Ненормально высокое количество клеток любой линии
Многоочаговая лимфома
Гиперпротеинемия, связанная либо с моноклональной либо с поликлональной гаммопатией
Гиперкалиемия неясного происхождения

Методика аспирации и биопсии, применяемая в Великобритании

Оборудование для отбора проб костного мозга:

Для отбора проб костного мозга необходимы специальные иглы со стилетом. Наиболее часто используются следующие виды игл:

Иглы Клима (рис. 1), размером 16 или 18 и длиной 28 или 37 мм. Эти хирургические стальные иглы можно повторно стерилизовать неограниченное число раз, хотя иногда может потребоваться периодическая заточка. Более длинную иглу можно использовать фактически для всех мелких животных.

Рис. 1. Игла Клима.

Сменные иглы. Такие, как сменные модифицированные Иллинойские иглы Джемшиди для грудинной и подвздошной костномозговой аспирации (рис. 2), используются в диапазоне размеров 15 или 18, длина 60-80 мм.

Рис. 2. Сменная модифицированная Иллинойская игла Джемшиди для грудинной и подвздошной аспирации костного мозга. С иглы снят защитный колпачок (внизу справа), который удерживает на месте стилет, а центральный стилет (с белым наконечником) частично выдвинут.

Рис. 3. Игла Джемшиди (справа налево): внешняя игла, центральный стилет, тупоконечный зонд.

Иглы Джемшиди (рис. 3) с минимальным диаметром 14 размера требуются для выполнения пункционной биопсии. Длина их составляет 95 мм. В некоторых странах используется сменный вариант игл с таким широким диаметром.

Аспирация костного мозга

Обычно в качестве места, в котором производится аспирация костного мозга, выбирается подвздошный гребень. В качестве альтернативы могут быть выбраны ягодичная поверхность крыла подвздошной кости, вертлужная впадина и проксимальная часть плечевой кости (рис. 4). У карликовых собак и кошек предпочтительно выбрать вертлужную впадину. У животных с сильным ожирением иногда полезно выбрать большеберцовый гребень.

Рис. 4. Места, обычно используемые для аспирации костного мозга

Подготовка

На чистой поверхности размещают несколько чистых предметных стекол, установив их почти вертикально. Подготовить второй набор предметных стекол, пригодных для приготовления мазков. Необходимо 2 помощника: один фиксирует животное, в то время как другой помогает готовить мазки (если пробы успели свернуться до изготовления мазка, то результаты трудно или невозможно интерпретировать).

Фиксация больного животного

Как аспирация костного мозга, так и пункциональная биопсия могут быть выполнены под местной анестезией и с применением легких седативных средств (используя комбинации нейролептоанальгетиков). Местную анестезию следует применять всегда, когда нет ограничений на использование химических средств для фиксации. Для собак карликовых пород и для кошек, у которых отбор проб производится через вертлужную впадину, предпочтительно проводить эту процедуру под общим наркозом из-за близости седалищного нерва к месту биопсии. А также из-за того, что требуется обеспечить неподвижность. Методика отбора проб через подвздошную кость описана подробно ниже.

Методика

Уложить собаку в положение лежа на груди с согнутыми и поджатыми лапами, подобной позе сфинкса (рис. 5). Нащупать пальцами подвздошный гребень. Выстричь участок и подвергнуть его асептической обработке. Инфильтровать кожу и подкожный слой над подвздошным гребнем средством местной анестезии, пользуясь иглой 23 размера длиной 25 мм. Вводить иглу до тех пор, пока она не упрется в кость, затем местное обезболивающее средство должно быть введено в надкостницу. Это очень важно, поскольку в противном случае процедура будет болезненной.

Рис. 5. Собака находится в положении для аспирации костного мозга. Задние лапы больного животного согнуты и прижаты к телу.

Сделать с помощью скальпеля небольшой колотый разрез кожи, покрывающей это место. Крепко удерживая левой рукой подвздошный гребень, ввести иглу сквозь подкожную клетчатку и мышцы до тех пор, пока она не коснется кости. Вращать иглу, сильно нажимая на нее при этом. В это время очень важно не изменять направление движения иглы: она должна быть расположена вертикально, либо слегка наклонена в вентро-медиальном направлении. После того, как игла пройдет через компактный слой кости, она должна быть плотно зажата внутри подвздошной кости. Затем вынимают из аспирационной иглы стилет, присоединяют к игле шприц на 10 или 20 мл и создать отрицательное давление. На этой стадии собака может ощутить временное неудобство. Как только в шприце появится небольшое количество кровянистой жидкости, аспирацию следует прекратить. В противном случае собранный костный мозг окажется излишне разбавленным кровью.

Извлечь шприц и иглу как единое целое, не разъединяя их. Нанести каплю костного мозга на верхнюю часть каждого предметного стекла (рис. 6). Небольшие спикулы костного мозга остаются прилипшими к стеклу после того, как кровь стечет вниз под действием силы тяжести (рис. 7). Очень важно быстро изготовить мазки. Надо взять одно из предметный стекол с костным мозгом и наложить на него поперек под прямым углом второе предметное стекло (рис. 8). Приложив небольшое усилие, быстро провести вторым (верхним) предметным стеклом по пробе, находящейся на первом предметном стекле (рис. 9). Так создается мазок на нижней стороне второго предметного стекла. Мелкие частицы бледного оттенка на предметном стекле принадлежат костному мозгу. После этого закрыть колотый разрез одним швом.

Рис. 6. Капли мозга немедленно наносятся на верхние части установленных предметных стекол

Рис. 7. По мере стекания крови винз видны прилипшие к стеклу бледные частицы костного мозга.

Рис. 8. Держа одно из предметных стекол в левой руке взять в правую руку второе предметное стекло и наложить его поперек первого под прямым углом. Слегка прижать.

Рис. 9. Верхним предметным стеклом (в правой руке) быстро провести поперек первого, создавая таким образом мазок на нижней поверхности верхнего предметного стекла.

функции и строение :: SYL.ru

В составе крови человека имеется множество групп клеток, каждая из которых отвечает за собственную функцию. Часть из них необходима для доставки кислорода ко всем тканям организма. Другие способствуют остановке кровотечения. Третьи обеспечивают защиту организма от различных вредных веществ. Для того чтобы все эти клетки нормально функционировали, им необходимо постоянно обновляться. Для этого и существует красный костный мозг. Он является основным органом кроветворения. Именно там происходит образование и размножение клеток. Благодаря этому костный мозг обеспечивает 2 важнейших функции организма – кроветворение и иммунитет.

Красный костный мозг: строение органа

Костный мозг – это полужидкое вещество, имеющее тёмно-красный оттенок. Если собрать все его части воедино, то общая масса составит около 2-3 кг. Красный костный мозг человека распределён по всему организму. Большая его часть сосредоточена в тазу и ребрах. Также он имеется в длинных трубчатых костях (в конечностях). Кроме того, часть этого органа расположена в позвонках. Красный костный мозг состоит из 3 видов клеток. К ним относятся:

Недифференцированные элементы. По своему составу они напоминают клетки эмбриона. Эти частицы не имеют определённого направления развития, в связи с чем их называют стволовыми клетками. Они не способны к самовоспроизведению, так как при делении образуют предшественников кроветворной или иммунной системы. По этой причине недифференцированные клетки находятся в ограниченном количестве. Они имеют огромное значение для современной медицины.
Мультипотентные клетки. Эти элементы костного мозга являются низкодифференцированными. При их делении образуются лейкоцитарный или эритроцитарный росток кроветворения. Помимо этого, их дочерними клетками являются мегакариобласты – предшественники тромбоцитов.
Зрелые ростки кроветворной системы. К ним относятся: эритро-, лимфо-, моно-, гранулоцитарные и макрофагальные клетки.

Развитие костного мозга

Красный костный мозг начинает своё развитие со 2-го месяца после зачатия. В этот период его можно обнаружить лишь в ключице зародыша. Через 1-1,5 месяца он начинает появляться во всех плоских костях плода. В этом периоде он выполняет остеогенную функцию. Другими словами, способствует образованию костной ткани у зародыша. На 12-14-й неделе развития кроветворные клетки начинают появляться вокруг сосудов плода. Приблизительно с 5-го месяца после зачатия многочисленные костные перекладины распадаются. В результате этого образуется костномозговой канал. Примерно на 28-й неделе развития этот орган становится кроветворным. В это же время его клетки заполняют трубчатые кости конечностей. У плода в основном развивается эритроидный росток кроветворения. У новорожденного в диафизах трубчатых костей появляются жировые клетки. В то же время эпифизы заполняются новыми очагами кроветворения.

Красный костный мозг: функции органа

Как уже говорилось, костный мозг является органом кроветворной и иммунной систем. Кроме того, именно он обеспечивает созревание стволовых клеток. Кроветворная функция костного мозга заключается в продукции предшественников эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов. Каждая из этих клеток имеет жизненно важное значение для нашего организма. Обеспечение иммунитета – тоже немаловажная функция. Благодаря ей организм человека может побороть все чужеродные частицы, которые ему угрожают. Клетки красного костного мозга, отвечающие за иммунитет, называются лимфоцитами и макрофагами. В последние годы изучение этого органа всё больше занимает умы учёных. Это связано с тем, что, помимо своих основных функций, он вырабатывает недифференцированные, или стволовые, клетки. Данное открытие стало большим прорывом в медицине, благодаря новым возможностям лечения тяжёлых заболеваний.

Обеспечение кроветворной функции организма

Красный росток костного мозга образуется при делении полипотентной клетки-предшественницы. В свою очередь, он может продолжить своё развитие как лейко- или эритроцитарная группа элементов крови. Также при делении клетки красного ростка образуются мегакариобласты. Они являются предшественниками тромбоцитов. Все эти клетки составляют кровь человека. Эритроциты необходимы для переноса кислорода ко всем тканям организма. Это очень важная функция крови, так как без неё наступает гипоксия, и человек может погибнуть. Лейкоциты являются белыми кровяными тельцами, которые необходимы для защиты организма от бактериальных и вирусных инфекций. Благодаря им в случае опасности в силу вступает защитный механизм – воспаление. Он направлен на уничтожение микробов и вытеснение их из организма. Тромбоциты нужны для остановки кровотечения.

Связь красного костного мозга с иммунитетом человека

Основной механизм защиты нашего организма от вредных агентов – это иммунная система. Красный костный мозг является одним из её центральных органов. Это связано с тем, что в нём созревают клетки гуморального иммунитета – В-лимфоциты. Их действие направлено на устранение инфекций в организме. Кроме того, они тесно связаны с другими клетками иммунной системы – Т-лимфоцитами. Эти элементы образуются в вилочковой железе. Их функция – обеспечение клеточного иммунитета. Помимо В-лимфоцитов, в красном костном мозге образуются макрофаги. Они нужны для захвата крупных чужеродных частиц и их уничтожения. При патологии костного мозга страдает вся иммунная система организма. Поэтому его защитная функция, как и кроветворная, является жизненно необходимой.

Диагностика патологий костного мозга

Заподозрить заболевания костного мозга можно по различным симптомам. Чаще всего при серьёзных патологиях этого органа дефекты заметны уже в период новорожденности. В некоторых случаях заболевания костного мозга являются приобретенными. Чаще всего они обнаруживаются по изменениям лабораторных анализов. Клиническими проявлениями патологий костного мозга могут быть слабость, потеря в весе, кровотечения, геморрагические высыпания на теле. При подозрении на заболевания костного мозга проводят ряд анализов. Они помогают уточнить диагноз. К этим анализам относятся коагулограмма, мазок крови, а также биопсия костного мозга. Обнаружить патологию могут врачи-гематологи или онкологи.

Заболевания красного костного мозга

К заболеваниям костного мозга относят различные виды анемий и лейкозов. Некоторые из них являются врождёнными и передаются по наследству, другие – возникают в процессе жизни. Например, В-12-дефицитная анемия чаще всего встречается у больных после резекции желудка. При этой патологии меняется состав не только крови (снижение гемоглобина, увеличение размеров эритроцитов), но и костного мозга. При окрашивании большая его часть становится синего цвета. Апластическая анемия – это заболевание, при котором угнетены все ростки кроветворения. При пункции костного мозга обнаруживается разрастание жировой ткани. Помимо анемий к патологиям кроветворения относятся гемобластозы. При них наблюдается опухолевое перерождение и усиленное размножение клеток костного мозга. Чаще всего встречаются лимфо- и миелолейкозы. При этих патологиях часть клеток усиленно размножается, вытесняя остальные ростки кроветворения. Эти заболевания могут быть острыми и хроническими.

Лечение патологий кроветворения

Выбор метода лечения зависит от самого заболевания, а также от его стадии. При В-12-дефицитной анемии применяют пожизненную заместительную терапию цианокобаламином. При угнетении всех ростков кроветворения требуется трансплантация костного мозга. Некоторые врождённые виды анемий до настоящего времени остаются неизлечимыми. Основным средством от гемобластозов является химиотерапия. В зависимости от вида лейкоза применяют определённую программу лечения. Препараты, входящие в состав химиотерапии, называются цитостатиками. Их действие направлено на подавление патологического роста опухолевых клеток крови. К сожалению, эти лекарства имеют множество побочных действий. В некоторых случаях врачи прибегают к трансплантации костного мозга. Обычно этот метод используются при тяжёлых заболеваниях кроветворения у детей.

Пересадка красного костного мозга

Как известно, красный костный мозг является единственным источником стволовых клеток. Этот вопрос уже несколько десятилетий активно изучается во всех странах мира. Пересадка костного мозга может спасти миллионы людей, страдающих тяжёлыми формами гемобластозов. Помимо этого, стволовые клетки используются в трансплантологии и пластической хирургии.